什么是胚胎玻璃化冷冻?如何以及何时使用此程序?

胚胎冷冻是一种生殖技术,用于保存体外受精IVF ) 周期产生的胚胎,这些胚胎无法在其创建的周期中进行移植。

当今最广泛使用的胚胎冷冻保存方法是玻璃化,这是一种超快速冷冻方法,与传统的慢速冷冻方法相比具有许多优点。

胚胎解冻后的高存活率使得体外受精周期得以优化,从而显著减少了成功怀孕所需的尝试次数。

下面提供了一个索引,其中包含我们将在本文中扩展的 9 点。

1.定义

与传统冷冻不同,胚胎玻璃化可以定义为超快速冷冻过程,其优点是由于使用冷冻保护剂而避免胚胎内部形成冰晶。这些晶体对其细胞结构造成的损害可能会损害胚胎的活力。

如今,玻璃化技术经常用于卵子和胚胎的冷冻保存。它已成为辅助生殖实验室的基本工具。多亏了它,胚胎可以保存下来供以后使用

胚胎玻璃化冷冻可以实现什么?

执行玻璃化程序后,它们将被储存​​在 -196°C 液氮库中的特定吸管中直至使用。没有证据表明储存时间会影响其活力和植入机会。如果不进行冷冻胚胎移植,每年都会向患者咨询胚胎的用途。

胚胎冷冻保存的最长期限为25 年,可以孕育出健康的婴儿。这就是俗称的雪宝宝

我们建议您访问以下文章,了解有关此主题的更多信息:胚胎、精子和卵子的冷冻保存和玻璃化

1.1什么时候使用?

在 IVF 周期中,特别是在卵巢刺激和卵子受精之后,所得胚胎需要培养数天。

然而,胚胎最多可以培养6天。因此,有必要冻结它们,直到我们决定它们的命运。

胚胎玻璃化冷冻还提供了一种解决方案,例如:

  • 在同一刺激周期中转移取消。例如,由于发生OHSS的高风险或由于子宫内膜准备不足。
  • 已进行新鲜胚胎移植,但如果结果呈阴性或患者想要更多孩子,则可以在后续周期中移植备用胚胎。
  • 生育力保存。一些夫妇决定冷冻保存胚胎,而不是分别冷冻卵子和精子
  • 已经进行了PGD /PGS胚胎活检,但这对夫妇必须等待几天的结果。
  • 卵子捐赠周期中,如果捐赠者和接受者的周期未能同步。玻璃化冷冻可以冷冻保存供体卵子或所得胚胎。
  • 一名妇女或夫妇决定将体外受精周期后未使用的胚胎捐赠给其他夫妇。

何时选择胚胎玻璃化冷冻

因此,在某些情况下,建议将胚胎玻璃化以进行延迟胚胎移植。为了在生殖治疗中取得最大的成功,评估每个患者的具体情况至关重要。

1.2.优点

如上所述,胚胎玻璃化冷冻导致了 IVF 周期前所未有的优化。事实上,累积妊娠率(单个刺激周期中每次取卵的妊娠率)在过去几年中经历了大幅增长。

患者的身体和情感负担显着减轻,因为他们不必在后续周期中使用激素药物,包括皮下注射。下一个 IVF 周期将涉及冷冻胚胎移植 (FET)。

高级临床胚胎学家 Edurne Martínez 解释说,胚胎在浸入液氮之前首先要脱水。然后,它们再次被补充水分,并置于37°C的温度下,这是人类的平均体温。

马丁内斯认为这项技术非常有用,因为它为卵子受精后的胚胎保存提供了多种选择,要么是因为有剩余的胚胎,要么是因为子宫内膜或女性还没有准备好进行移植。

Edurne Martínez,高级临床胚胎学家

此外,胚胎玻璃化冷冻可以将胚胎逐个移植,从而降低了IVF 周期中的多胎妊娠率。

胚胎玻璃化冷冻的好处

最后需要指出的是,当我们将玻璃化冷冻技术与传统的慢速冷冻技术进行比较时,前者相对于后者最显着的优势是胚胎的存活率在90%以上。

2.玻璃化冷冻过程的一步一步

为了成功地进行玻璃化过程,实验室工作人员必须由经验丰富的专家组成,因为这是一个具有挑战性的过程,必须在短时间内完成。

最常见的玻璃化方法是 Cryotop,由 Kitazato 品牌销售。以下是一般步骤:

  1. 将胚胎脱水,将其转移到含有浓度不断增加的冷冻保护剂的不同介质中。
  2. 将胚胎轻轻地放在支持系统上进行冷冻保存。就 Cryotop 而言,这个系统就是一根救命稻草。

胚胎脱水以进行玻璃化冷冻

  1. 将带有胚胎的吸管放入充满液氮的小比色皿(容器)中。
  2. 将吸管连接到其盖子上,注意它距离容器中排出的蒸汽不要太远。
  3. 最后,将装有胚胎的吸管放入液氮罐中进行冷冻保存。

-196°C 胚胎玻璃化冷冻

在整个过程中,胚胎会在短短几秒钟内掉落,从培养温度(37℃)转移到冷冻液氮温度(-196℃)。

另一方面,重要的是要记住,胚胎必须具有最低质量水平才能在冻融过程中存活。这意味着发育不充分或有退化迹象的胚胎将不会被冷冻。

冷冻保护剂是一组取代胚胎细胞内水性液体的分子,可保护胚胎的内部结构免受过低温度的影响。

3.胚胎解冻

先前冷冻胚胎的解冻过程比冷冻胚胎更快、更简单。简单来说,就是将吸管从液氮罐中取出,取下盖子,直接放入37℃的培养基中。

在移液管的帮助下,用培养基覆盖胚胎,将其从吸管上分离出来。然后,胚胎通过几种冷冻保护剂浓度逐渐降低的介质。所有这些过程都是为了给胚胎细胞补充水分,从而取代水的冷冻保护剂。

胚胎如何解冻?

在进行胚胎解冻过程时,严格遵守规定的时间至关重要。否则,胚胎细胞可能会受损,胚胎可能无法在此过程中存活。

在进行冷冻胚胎移植之前,必须提前几个小时解冻胚胎,并确定它们是否能够存活。

一般来说,胚胎解冻是在胚胎移植当天进行,特别是提前几个小时,以检查胚胎的状态。除此之外,传输就像一个新的循环一样进行。

4.成功率

新鲜试管婴儿周期的成功率略高于冷冻胚胎。但是,尽管如此,冷冻胚胎可以继续正常发育,附着在子宫上,最重要的是,可以产下健康的婴儿。

例如,考虑到经过基因分析的胚胎,根据西班牙生育协会(SEF)2021年的统计报告,新鲜胚胎移植的妊娠率为46.7%;冷冻胚胎移植的妊娠率为53.0%。

另一方面,新鲜胚胎移植的分娩率为39.3%,冷冻胚胎移植的分娩率为42.0%。

冷冻胚胎的成功率

冷冻胚胎移植后能否怀孕取决于以下因素:

  • 胚胎解冻后的存活率
  • 胚胎质量及其生长潜力
  • 移植时的子宫内膜容受性

如上所述,解冻后胚胎的存活率很高,这证明它们可以保持完整。为此,实验室拥有高质量的玻璃化程序,并且工作人员在执行该程序时足够小心,这一点非常重要。

5.成本

胚胎玻璃化冷冻平均费用约为1,000 美元。例如,在生育患者常见的目的地国家西班牙,费用在 350 欧元到 600 欧元之间,具体取决于所选的诊所。在这个基本费用的基础上,我们应该加上储存费,因为将胚胎储存在液氮中意味着生育诊所的费用。

如果您正在考虑冷冻保存配子或胚胎以便将来生育,我们建议您首先获取生育力报告。只需 3 个简单的步骤,它就会向您显示符合您偏好并符合我们严格质量标准的诊所列表。此外,您将通过电子邮件收到一份报告,其中包含首次访问生育诊所的有用提示。

因此,简而言之,储存胚胎是一项由患者付费的服务,通常每年支付一次,每年加起来可能高达 500-800 美元。一些诊所将第一年的储存费用包含在胚胎玻璃化冷冻的费用中。

此外,解冻过程和随后的冷冻胚胎移植可能花费 1,000 至 2,000 美元或更多。为此,应该增加大约 400 美元的药物来准备子宫内膜。

6.用户常见问题解答

6.1.在发育第 3 天或第 5 天冷冻胚胎哪个更好?

作者:布兰卡·帕拉伊索 (Blanca Paraíso) 医学博士、哲学博士、理学硕士 (妇科医生)。

科学证据似乎表明,最好在囊胚阶段移植胚胎,因为它们将比第 3 天的胚胎获得更高的妊娠率。植入率的增加部分归因于胚胎和子宫内膜之间更好的同步,但最重要的是,更好地选择胚胎。并非所有第 3 天的胚胎都会进入囊胚阶段,因此,如果我们可以通过长期培养丢弃这些胚胎,我们将避免无用的移植。

在胚胎冷冻第 3 天和第 5 天进行的第一项研究似乎发现囊胚期胚胎的结果更差。这是因为所使用的冷冻技术是缓慢冷冻,这会降低胚胎在解冻后的存活率,尤其是囊胚期胚胎。如今,使用的技术是玻璃化冷冻,胚胎存活率接近 100%,无论是第 3 天的胚胎还是第 5 天的胚胎。

因此,鉴于囊胚会给我们带来比第 3 天胚胎更高的妊娠率,并且它们具有非常高的冷冻存活率(使用玻璃化冷冻),似乎可以清楚地推断出冷冻第 5 天胚胎会更好。

确实,研究未能发现在发育第 3 天或第 5 天冷冻和移植胚胎对累积妊娠率有显着差异。事实证明,通过在第 5 天冷冻胚胎,冷冻的胚胎数量会减少,并且实现怀孕所需的移植次数也会减少。

6.2.胚胎玻璃化冷冻技术有什么缺点吗?

作者:Mark P. Trolice 医学博士、FACOG、FACS、FACE(生殖内分泌学家)。

多年来,胚胎冷冻都是使用“慢速冷冻”方法进行的。在过去的十年中,玻璃化技术已经取代了慢速冷冻。前一过程涉及快速冷冻方法,这对于卵母细胞(卵子)冷冻非常重要。由于卵母细胞含水量高,慢速冷冻方法会导致卵母细胞内形成晶体,导致结果不理想。

玻璃化冷冻可以改善胚胎和卵母细胞的所有结果,包括存活率。任何冷冻方法都存在由于解冻后存活、储存罐故障、由于患者年龄、相关因素或胚胎学家的技能而导致的胚胎对冷冻的耐受性而导致胚胎丢失的风险。目前,尚无已知的使用玻璃化冷冻所特有的缺点。

6.3.失透胚胎的存活率高吗?

作者:阿尔瓦罗·马丁内斯·莫罗 学士、硕士 (胚胎学家)。

失透胚胎的存活率取决于胚胎的活力和对该过程的耐受性,以及对方案中建立的程序的遵守情况。因此,为了分析存活率,我们必须了解什么是玻璃化。

此外,值得注意的是,胚胎失透的成功并不在于胚胎失透后的存活率。真正重要的是获得与使用新鲜胚胎时类似的结果。
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6.4.可以冷冻C类胚胎吗?

作者:Zaira Salvador 学士、硕士 (胚胎学家)。

绝对没错。然而,C 类胚胎的着床率低于 A 类和 B 类胚胎,因为它们的发育不充分,或者它们呈现出某些可能在某种程度上损害其生存能力的特征。

由于这些胚胎的质量较差,在大多数情况下,它们会被培养几天以监测其发育情况。如果它们充分生长,就可以冷冻保存。然而,如果它们的发展停止,它们将被丢弃并被认为是不可行的。

6.5.胚胎玻璃化冷冻和冷冻有何区别?

作者:Zaira Salvador 学士、硕士 (胚胎学家)。

胚胎冷冻实际上是玻璃化冷冻技术发现之前使用的方法。这是一个缓慢、渐进的过程,可能持续长达 2-3 小时。由于冰晶对胚胎造成的损害,存活率不太高。尽管它可以冷冻第 2-3 天的胚胎,但囊胚无法存活。

相反,胚胎玻璃化是一种超快速的过程,只能持续几分钟,最重要的是,它还可以冷冻保存囊胚。这项技术对胚胎无害,因为它可以防止冰晶的形成。

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如上所述,胚胎玻璃化冷冻是当今所有 IVF 实验室的一项基本技术。每当有未使用的胚胎时,它们就会被冷冻保存以供以后使用。在这里阅读更多内容:未使用的体外受精胚胎的命运是什么?

先前玻璃化胚胎的移植与新鲜胚胎的移植相同。不过,如果您想了解有关此程序的更多信息,那么您可以继续阅读此处:冷冻胚胎移植

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