在体外受精( IVF ) 治疗中,无论是传统的 IVF 还是ICSI,胚胎都需要在实验室中培养数天,以决定哪些胚胎需要移植到子宫,哪些需要冷冻(玻璃化冷冻)。为了做出决定,必须在胚胎发育的各个阶段评估其质量。
根据胚胎发育的不同日期,胚胎学家会分析不同的特征,以确定其质量以及是否能够植入并怀孕。如果胚胎质量不佳,它们可能会停止发育,导致植入失败,甚至在怀孕的头几个月内导致流产。
在体外受精实验室中,胚胎最多需要培养 6 天,从 1 天大的受精卵发育成 5 或 6 天大的具有大量细胞的囊胚。
下面提供了我们将在本文中详细阐述以下几点内容。
在 IVF-ICSI 过程中,卵子受精在实验室进行,评估由此产生的胚胎的质量非常重要。
获得多个胚胎的情况很常见,因此胚胎的分类有助于选择培养中哪些胚胎最有可能植入并导致妊娠。因此,在移植时会考虑胚胎的分类,因为最高质量的胚胎才是被植入子宫的胚胎。
评估胚胎的质量需要考虑其形态学的不同特征,即其形状或外观,以及它们在培养过程中的演变。为此,有两种选择:
第一种方案是传统方法,而第二种方案是辅助生殖实验室近期新增的。延时摄影系统使胚胎学家能够观察整个胚胎发育过程,而不仅仅是在显微镜下观察的特定时刻。它还能避免胚胎从孵化器中取出时的温度和气体变化,从而减少压力并提高胚胎存活率。
无论是通过在显微镜下直接观察还是使用延时系统,几乎每天都会对胚胎进行评估,直到它们被移植或冷冻。
根据不同的情况,胚胎学家必须观察胚胎形态的不同方面来对其进行分类。
接下来,让我们来谈谈这些发育日以及胚胎预计会是什么样子。
受精后的第二天(第 0 天),需要通过出现第一个胚胎阶段来确认卵子是否已受精:受精卵或合子。
这是一个尚未开始分裂的单细胞,其中应观察到以下情况:
为避免误解,应在体外授精或显微注射后16至18小时内观察(授精后)。如果观察时间较晚,则原核可能已经消失,这是第一次分裂发生的必要条件,而第一次分裂将形成双细胞胚胎。
两个原核的存在证实了受精。如果观察到1个或3个原核,则应丢弃该胚胎,因为这表明胚胎的遗传禀赋不足。它们在接下来的几天内发育的方式与可存活胚胎相同,因此在原核融合发生之前观察它们非常重要,因为在发生之前我们无法区分可存活胚胎和不可存活胚胎。
在前两次分裂(发育第2天)后,胚胎必须拥有4个细胞,称为胚泡。胚泡的数量及其在此时的外观都将对胚胎的分类起到决定性作用。观察到少于4个或更多的细胞则表明发育延迟或加速。
对处于此发育阶段的胚胎的观察应在授精后44至45小时内进行,主要关注以下方面:
一些胚胎改变会或多或少地影响胚胎的植入能力,因此会据此分配一个或另一个质量类别。
为了分析第三天的胚胎质量,需要在授精后68至69小时内对胚胎进行评估。此时,需要分析与发育第二天相同的参数,以及胚胎分裂的节律。
质量最好的胚胎是第二天从 4 细胞胚胎发育而来的具有7-8 个细胞的胚胎。
胚胎可以在发育至此阶段进行移植,或留在培养箱中直至第5天或第6天进行囊胚移植。此外,未移植的胚胎可以在此时或第5天或第6天进行玻璃化冷冻。
致密化是指胚胎细胞之间形成紧密连接,最终形成桑葚胚的过程。致密化通常在发育第四天开始,但有些胚胎可能在第三天就出现了早期致密化的迹象。
桑葚胚可以在受精后90至94小时内观察到。由于此时所有细胞都已紧密结合,因此无法观察到这些胚胎的显著特征,因此此时无法提供关于胚胎状态的信息。
尽管如此,以下几个方面值得重视:
第 3 天的最佳胚胎具有以下特征:它具有 8 个以上的细胞,它是紧密的或紧密的,并且紧密程度影响胚胎的整体体积。
在受精后 114 至 118 小时(第 5 天)或 136-140 小时(第 6 天)之间,我们会看到囊胚,这是在实验室中进行的胚胎发育的最后阶段。
囊胚的形成对于胚胎在子宫内植入至关重要,因此其在培养中的形成被认为具有良好的预后。
这些胚胎在形态上呈现出两种关键结构:
内细胞团(ICM):将会形成胚胎层,并发育出婴儿的器官
滋养外胚层或外部细胞团:将会起源于胎盘。
这两种结构都以囊胚腔的外观为特征:中央腔内充满液体。
采用与 Gardner 在 1998 年提出的类似的参数来评估囊胚的质量:
透明带的厚度也需要考虑。透明带必须变薄,才能使囊胚扩张并脱离子宫,植入子宫内膜。良好的透明带与良好的胚胎质量和较高的植入概率相关。
目前,胚胎是根据形态发生质量进行分类的。
第 3 天的胚胎和囊胚都可以进行分类,但分类方式不同,因为两个阶段的胚胎结构也不同。
根据上一节提到的不同参数,对第2天和第3天的胚胎进行以下质量等级:
正如我们已经看到的,为了评估囊胚,通常的胚胎分类由一个数字和两个字母组成:数字(1 至 5)表示囊胚的扩张程度;第一个字母(A、B、C 或 D)表示内部细胞团的质量;第二个字母(A、B、C 或 D)表示外胚层的质量。因此,形态最佳、植入能力最高的囊胚是 3AA 级。
根据扩展分配的数字类别如下:
对于内部细胞团,其 4 个类别如下:
另一方面,外胚层必须只有一层。根据其细胞状态,外胚层可分为以下几类:
胚胎学家 Jose Luis De Pablo 告诉我们评估囊胚时需要考虑的因素:
“在囊胚中,有两个基本部分受到重视:内部细胞团(将产生胚胎)和外胚层(将产生胎盘的细胞层)。”
“根据细胞数量、内部细胞团的紧密程度以及这些细胞的分布,可以确定囊胚的最终类别。”
生殖生物学研究协会 (ASEBIR) 提出了一种新的胚胎分类,该分类更加重视滋养外胚层的形态,而不是内部细胞团的形态。
其中,质量用单个字母(A、B、C 或 D)表示,涵盖内部细胞团 (ICM) 和滋养外胚层的状态。因此,如果 ICM 的质量为 A,滋养外胚层的质量为 B,则囊胚的总体评估为 B。
在传统和新分类中,如果将胚胎进行长期培养以进行囊胚阶段移植,则有必要考虑早期分类(第 2 天和第 4 天)以及第 5/6 天呈现的分类以进行整体评估。
还需要记住的是,胚胎评估通常非常主观,因此实验室之间可能会存在差异。
作者:Alicia Francos Pérez 医学博士、理学硕士(妇科医生)。
囊胚阶段的特征在于细胞排列方式:在胚胎的某个区域,会聚集一个细胞群,称为内细胞团,它将发育成胚胎和胎儿,我们稍后会在超声波扫描中看到它们。而胚胎的其余部分则被一排细胞包围,这些细胞将发育成胎膜和胎盘,我们称之为滋养外胚层。在中心区域,有一个没有细胞、内部充满液体的区域,称为囊胚,它将发育成羊水。
早期囊胚和扩张囊胚的区别在于:早期囊胚,这三个部分的分离开始显现,最初出现囊胚膨出,并分化成两组细胞,一组将发育成内细胞团,另一组将发育成滋养外胚层。在此阶段,囊胚尚未明显扩张,因此各个区域尚未清晰分化。此胚胎阶段通常在第四天末或第五天初开始显现。
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作者:Zaira Salvador 学士、硕士(胚胎学家)。
只要其他因素(子宫内膜、移植……)正确,这个概率就很高。我们可以推断,在条件正确的情况下,这些胚胎的妊娠率可以超过70%。
作者:Zaira Salvador 学士、硕士(胚胎学家)。
它相当于一个包含8个II类或B类细胞的胚胎,因此质量虽然不是极好,但还算不错。这些胚胎的植入率很高,因此怀孕的概率也很高。
作者:Zaira Salvador 学士、硕士(胚胎学家)。
这类胚胎植入的可能性较低,因为它们的质量较差。它们有退化的迹象、严重的形态学改变(例如高度碎片化或空泡化),或分裂节律异常。建议避免移植这类胚胎,但如果没有其他质量更好的胚胎,则可以移植。即使植入的可能性很低,它们也可能成功怀孕。
作者:Zaira Salvador 学士、硕士(胚胎学家)。
并非所有胚胎都能在冻融过程中存活。质量最好的胚胎存活率更高,因此最好冷冻A级和B级胚胎,尽管也可以冷冻C级胚胎。但是,如果夫妇没有更优质的胚胎,即使是D级胚胎也可以冷冻,但由于D级胚胎的存活率较低,并非所有中心都这样做。在大多数情况下,对质量较差的胚胎的处理方式是将其培养5-6天(在“观察”下),以观察其发育情况。
作者:Zaira Salvador 学士、硕士(胚胎学家)。
第二天的最佳胚胎是4个细胞的胚胎,而第三天的最佳胚胎是8个细胞的胚胎。正如我们在文章中看到的,细胞数量过多或过少都表明胚胎质量不佳。
如果有 6 个细胞,则胚胎将被归类为 C 类,无论是第 2 天还是第 3 天。如果有 8 个细胞,则需要评估第 2 天的细胞数量。因此,如果它来自第 2 天有 4 个细胞的胚胎,则其质量为 A,而如果它有 6 个细胞,则其质量为 C 类。如果它来自第 2 天有 4 个细胞的胚胎,则其质量为 A,而如果它有 6 个细胞,则其质量为 C 类。
作者:Zaira Salvador 学士、硕士(胚胎学家)。
这种类型的囊胚质量极佳,内部细胞团块饱满,外胚层形态良好。它具有较高的植入能力,因此妊娠概率也很高。然而,并不能保证女性一定能怀孕。良好的胚胎质量对植入有很大影响,但其他因素,例如移植时的子宫内膜状态、母亲的年龄或不孕症的原因,也会受到影响。
作者:Zaira Salvador 学士、硕士(胚胎学家)。
有几个内在和外在的因素会影响胚胎质量:
话虽如此,对于预后良好且生殖健康状况良好的女性来说,很难知道可能影响特定病例的具体原因。
如果您想了解更多有关胚胎学家确定胚胎质量所遵循的标准,请不要错过以下文章:胚胎质量和分级 - 它会影响 IVF 成功吗?
另一方面,囊胚由于发育程度较高,是植入能力最高的胚胎。如果您想了解更多信息,可以继续阅读:什么是长胚胎培养和囊胚分级?
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